肝胰腺微孢子蟲病 (HPM) 是由細胞內微孢子蟲肝對蝦腸胞菌 (EHP) 引起的，已在幾種對蝦中報道，包括：斑節對蝦和南美白對蝦。並且，EHP已在不同地區報告，包括：中國、印度尼西亞、馬來西亞、越南、泰國和印度等亞洲國家。最近，位於西半球的委內瑞拉也報道了EHP。

一、首次研究確定：蝦便可能成為EHP傳染途徑

EHP在肝胰腺 (HP) 小管上皮細胞中引起病變，其主要臨床症狀是：生長緩慢，導致大小不一。漂浮在池塘水面上的白便和蝦胃腸道變白色，也與EHP相關。在疾病的晚期，感染EHP的蝦通常表現出：軟殼、嗜睡、攝食量減少、空腸空道和慢性死亡。

今天，筆者報告了一項研究的結果，以三種不同的鹽度比較了EHP的感染性。

二、研究設置

1、生物測定在亞利桑那大學的水產養殖病理學實驗室 (UA-APL) 進行。無特定病原體 (SPF)南美白對蝦購自美國佛羅里達州的一家商業孵化場。過去兩年，在UA-APL對SPF蝦苗進行了篩查，沒有發現包括EHP等疾病。

2、研究分為兩個的EHP挑戰，在這兩個挑戰中，蝦都維持在2ppt、15ppt和30ppt三種不同的鹽度下。對於每個實驗挑戰，六個90升的水箱中裝滿了對應於三個鹽度水平的人造海水，每種鹽度有2組池塘。每天早上測量溫度調整為25攝氏度 (±0.6)；每週測量一次pH值，範圍為7.5-8.0。

3、在每個水箱中分別抽取10尾SPF南美白對蝦（2.0-2.1 克）用於實驗EHP感染。

三、結果與討論

1、我們調查了三種鹽度中EHP的患病率和嚴重程度：在實驗室受挑戰的條件下：高 (30ppt)、中 (15ppt) 和低 (2ppt)。組織病理學和 PCR 證實，在實驗挑戰中用作EHP接種源的糞便，足以讓不同鹽度下的蝦生病。這項研究的結果提供了一種通過糞-口途徑感染EHP的新方法。

2、EHP挑戰結束時的最終存活率很高，從90%到100%，在兩個獨立實驗挑戰的三個鹽度中（表1）。在兩個獨立的挑戰實驗中，在所有鹽度中，對照處理的存活率都是 100%。在3種不同鹽度下，我們沒有觀察到暴露於EHP的蝦的任何臨床症狀。

3、挑戰1中2ppt、15ppt和30ppt鹽度的EHP的患病率分別為25%、33.3%和25%。在挑戰2中，EHP在2ppt、15ppt和30ppt的患病率分別為33.3%、30.0%和87.5%。在第二個實驗中，鹽度為30ppt時嚴重程度更高。在挑戰2中，30ppt的EHP感染蝦群中有50%表現出G3級（中度至重度）和G4級（重度）病變。我們發現鹽度與感染EHP的蝦之間存在很強的關聯，暴露於高鹽度（30 ppt）的蝦中EHP的患病率高於暴露於低鹽度的蝦（2ppt和15ppt的總和）。本研究中不同的嚴重程度如圖1所示。

4、以前的研究表明，一些感染途徑包括同居、反向灌胃和直接肝胰腺注射EHP接種物。在這項研究中，我們首次報道了糞便可能是一種傳染性汙染途徑。由於有害的行為和糞便中未消化的飼料（可能約為25%-30%）的存在，可以增加EHP的傳播。

5、維持在30ppt鹽度的蝦的組織學損傷更為嚴重。在50%受影響的蝦中發現了中度至重度感染 (G3-G4)。相比之下，在鹽度為2ppt的蝦中，只有16%的蝦表現出G3級感染水平，而在鹽度為15ppt的蝦中，只有0%的蝦表現出G2-G4 級感染水平。三種不同鹽度下EHP感染嚴重程度的差異，可能是由於鹽度對孢子萌發的不同影響。孢子萌發的關鍵階段之一是孢子內滲透壓的增加。與30ppt的高滲環境相比，鹽度的差異導致2ppt和15ppt 的低滲環境。

6、硬度是本研究中使用的三種鹽度不同的另一個變量，可能是影響孢子萌發的一個因素。低鹽度 (2 ppt) 的硬度約為240 mg/L，而人工製備的海水為15ppt和30ppt，硬度分別約為787mg/L和1575mg/L。據報道，鈣是激活許多細胞事件的重要第二信使，鈣流入可能部分負責在較高鹽度下，激活微孢子孢子萌發。

四、結論

我們的研究結果表明，已知感染EHP蝦的糞便，可以用作可靠的傳染源。並且，EHP感染可在低鹽度（即2ppt）下發生，但是在30ppt鹽度時感染率和嚴重程度較高。這些發現對EHP流行地區的疾病管理具有重要意義。